簡要描述：◆用途● 制備雜交瘤● 應(yīng)用于癌細(xì)胞與樹狀細(xì)胞融合的癌癥免疫研究● 應(yīng)用于內(nèi)臟來源細(xì)胞與干細(xì)胞融合的再生醫(yī)療研究● 應(yīng)用于去核未受精卵的核移植等的發(fā)育、繁殖和育種研究● 替代電融合法、PEG 法
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| 品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 一個(gè)月 |
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GenomONE ® -CF EX
GenomONE ® 仙臺病毒包膜細(xì)胞融合試劑
本產(chǎn)品目前無法提供。
FUJIFILM Wako可提供多種轉(zhuǎn)染試劑及重編程試劑，點(diǎn)擊下方文字即可查看產(chǎn)品詳情：
轉(zhuǎn)染試劑
無需預(yù)孵育！導(dǎo)入細(xì)胞質(zhì)的蛋白轉(zhuǎn)染試劑 ：ProteoCarry
DNA & siRNA 轉(zhuǎn)染試劑：ScreenFect™ A plus
重編程試劑
StemRNA第三代重編程試劑盒
SRV™ Vector 系列
GenomONE®-CF EX 含有仙臺病毒包膜和專用緩沖液，可促使細(xì)胞融合。
適用于貼壁/懸浮狀態(tài)的所有細(xì)胞，僅需 30 min，即可制備融合細(xì)胞和雜交瘤。
◆用途
● 制備雜交瘤
● 應(yīng)用于癌細(xì)胞與樹狀細(xì)胞融合的癌癥免疫研究
● 應(yīng)用于內(nèi)臟來源細(xì)胞與干細(xì)胞融合的再生醫(yī)療研究
● 應(yīng)用于去核未受精卵的核移植等的發(fā)育、繁殖和育種研究
● 替代電融合法、PEG 法
◆HVJ Envelope（HVJ-E）：
HVJ 包膜（HVJ-E）是wan全滅活和純化仙臺病毒（HVJ*），即只留下細(xì)胞膜融合能力的衣殼蛋白包膜。仙臺病毒的HN蛋白可與細(xì)胞膜外的唾液酸受體結(jié)合，通過Ｆ蛋白的作用，引起細(xì)胞膜融合。在 HVJ-E 中，仙臺病毒的基因組 RNA 已經(jīng)wan全失活，在人類和實(shí)驗(yàn)動物體內(nèi)不存在感染或增殖。因而不需要特殊的操作和設(shè)備，它可以安全地在普通的實(shí)驗(yàn)室使用。
*HVJ：日本仙臺病毒
◆HVJ-E 細(xì)胞融合原理
在低溫（0 - 8℃)條件下，每一個(gè)細(xì)胞與數(shù)百個(gè)以上的 HVJ - E 接觸，HVJ - E 與細(xì)胞膜上的唾液酸受體結(jié)合，通過細(xì)胞表面吸附（步驟１），細(xì)胞通過 HVJ-E 相互連接（步驟２），形成細(xì)胞彼此聚集的狀態(tài)。當(dāng)該細(xì)胞/HVJ-E 的復(fù)合物加熱到 37℃ 時(shí)，細(xì)胞膜干擾就會進(jìn)一步擴(kuò)大，細(xì)胞膜內(nèi)膜結(jié)構(gòu)也暫時(shí)改變。這種變化是短暫的，隨后會立即返回到正常結(jié)構(gòu)，但是在這個(gè)期間，細(xì)胞膜利用強(qiáng)疏水性結(jié)合力進(jìn)行相互融合（步驟３）。
| 步驟一 | 步驟二 | 步驟三 |
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◆應(yīng)用方法
| 懸浮法 | 電融合法 |
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◆懸浮細(xì)胞融合案例
同種細(xì)胞融合
異種細(xì)胞融合
熒光標(biāo)記的紅（* 1）細(xì)胞和綠色熒光標(biāo)記（* 2）細(xì)胞（每1.0×105個(gè)）在融合緩沖液 50 μL 混合后，加入 HVJ-E 冰敷５分鐘，隨后 37℃ 下反應(yīng) 15 分鐘后，融合細(xì)胞（黃色）進(jìn)行了觀察。
◆黏著態(tài)和懸浮態(tài)細(xì)胞融合案例
在粘合狀態(tài)BHK-21（紅）和在浮動狀態(tài)（綠色）的P19細(xì)胞的融合
膠粘狀態(tài)的HeLa S3（紅）在浮動狀態(tài)（綠色）的P19細(xì)胞的融合
熒光標(biāo)記的（* 1）中的紅，附著的細(xì)胞在 12 孔平板，綠色熒光標(biāo)記（* 2）中，添加預(yù)先準(zhǔn)備的 HVJ-E，來處理漂浮細(xì)胞１×105個(gè)的懸浮液（融合緩沖污染），并在室溫下離心（1000轉(zhuǎn)），每個(gè)板５分鐘。隨后孵育37℃15分鐘后，更換增殖用的培養(yǎng)基繼續(xù)細(xì)胞培養(yǎng)。觀察３個(gè)小時(shí)后的融合細(xì)胞（黃色）。
◆和 PEG 法的比較
紅色熒光標(biāo)志(* 1）的 ratMSC（骨髓由來老鼠間葉系細(xì)胞）和綠色熒光標(biāo)識的老鼠原代培養(yǎng)心肌細(xì)胞２×105個(gè)融合緩沖液 50 μL 中混合后，添加 HVJ – E，冰?。捣昼姡缓?37℃ 孵育反應(yīng)15分鐘，觀察融合細(xì)胞（黃色）。１-２日培養(yǎng)后，觀察到粘著的融合細(xì)胞。在 PEG 法中融合緊接之后細(xì)胞毒性強(qiáng)烈，融合細(xì)胞的數(shù)量很少。
◆安全性說明
HVJ-E 失活的確認(rèn)（確認(rèn)無感染性病毒的存在）
| 1. | 細(xì)胞增值實(shí)驗(yàn)（熒光灶單元（FFU）法） 處理 LLC-MK2 細(xì)胞，一到兩天后，病毒生長性的 HVJ 融合蛋白F抗體通過熒光抗體法測定，已證實(shí)未檢測到病毒蛋白。<制造階段實(shí)驗(yàn)> |
| 2. | 受精卵生長試驗(yàn)（血凝單位測定） 處理受精卵，３天后的病毒增殖，包括在 HVJ 表面的 HN 蛋白的紅血細(xì)胞聚合活性（HAU）測量作為指標(biāo)，已經(jīng)證實(shí)，沒有看到病毒的生長。<制造階段實(shí)驗(yàn)> |
| 3. | 小鼠感染性研究 鼻腔給藥小鼠和未處理小鼠（SIX周）在相同籠中飼養(yǎng)，通過測定血清中的抗 HVJ 抗體滴度進(jìn)行了個(gè)體之間感染性的檢測。其結(jié)果是，在非給藥的情況下未觀察到抗體滴度增加，表明未感染 HVJ-E。 |
| 4. | 動物個(gè)體的遺傳基因?qū)雽?shí)驗(yàn) 小鼠、大鼠等實(shí)驗(yàn)動物的各種藥物實(shí)驗(yàn)（肺、氣管、肝和靜脈等）。已證實(shí)wan全沒you病毒感染或是可疑的事例。 |
| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品等級 | 備注 |
| 388-18721 | GenomONE ® - CF EX SeV-E (HVJ-E) 1 vial Cell Fusion Reagents GenomONE ® - CF EX 仙臺病毒包膜（1只裝）細(xì)胞融合試劑 | 1 set | － | － |
| 384-18723 | GenomONE ® - CF EX SeV-E (HVJ-E) 1 vial Cell Fusion Reagents GenomONE ® - CF EX 仙臺病毒包膜（1只裝）細(xì)胞融合試劑 | 4 sets | ||
| 382-18724 | GenomONE ® - CF EX SeV-E (HVJ-E) 1 vial Cell Fusion Reagents GenomONE ® - CF EX 仙臺病毒包膜（1只裝）細(xì)胞融合試劑 | 16 sets |
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