簡要描述：Iba1（Ionized calcium-binding adapter molecule 1）是分子量約為17 kDa的鈣結(jié)合蛋白。由于Iba1在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中特異性表達(dá)1），因此被用作小膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物。它在靜息型小膠質(zhì)細(xì)胞和活化型小膠質(zhì)細(xì)胞中均有表達(dá)，但有報(bào)告稱在活化型小膠質(zhì)細(xì)胞中其表達(dá)會(huì)有所增加2）。
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| 品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 一個(gè)月 |
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抗Iba1, 重組兔源單克隆抗體（6A4）
Anti Iba1, Rabbit Monoclonal Antibody (6A4), recombinant
Iba1（Ionized calcium-binding adapter molecule 1）是分子量約為17 kDa的鈣結(jié)合蛋白。由于Iba1在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中特異性表達(dá)1），因此被用作小膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物。它在靜息型小膠質(zhì)細(xì)胞和活化型小膠質(zhì)細(xì)胞中均有表達(dá)，但有報(bào)告稱在活化型小膠質(zhì)細(xì)胞中其表達(dá)會(huì)有所增加2）。另外，也會(huì)在外周組織的巨噬細(xì)胞中表達(dá)，被稱為AIF-1（Allograft inflammatory factor-1，同種異體移植物炎癥因子1）。Iba1在細(xì)胞內(nèi)與F-肌動(dòng)蛋白結(jié)合，發(fā)揮著形成肌動(dòng)蛋白纖維束的作用。這種肌動(dòng)蛋白纖維束的形成被認(rèn)為是在細(xì)胞遷移和吞噬過程中觀察到的細(xì)胞膜波動(dòng)結(jié)構(gòu)形成所必須的3）。
抗Iba1, 重組兔源單克隆抗體(6A4)，是針對小膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記分子Iba1的兔源單克隆抗體?？色@得與小膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物標(biāo)準(zhǔn)抗體Iba1兔多抗（產(chǎn)品編號：019-19741）相同的染色圖像。此外，在小鼠視網(wǎng)膜的免疫組織染色中也取得了良好的效果。
◆特點(diǎn)
● 性能與本公司的兔源多克隆抗體相同
● 低濃度（1:200-1:10,000）可染色
● *最佳濃度需探討
● 擁有為小鼠視網(wǎng)膜免疫組織染色的實(shí)例
◆抗體信息
抗體種類 | 單克隆抗體 |
抗原 | Iba1合成肽（C末端序列相同） |
免疫動(dòng)物 | 兔 |
緩沖液 | PBS（50%甘油），0.05%NaN3 |
濃度 | 1.0-1.2 mg/mL |
標(biāo)記 | 無標(biāo)記 |
交叉性 | 小鼠，大鼠 |
應(yīng)用 | 免疫組織染色（冰凍切片） 1:200-10,000 |
外觀 | 液體 |
◆性能數(shù)據(jù)
與本公司常規(guī)產(chǎn)品（兔源多克隆抗體）的比較
多克隆抗體 | 單克隆抗體 （產(chǎn)品編號：018-28523） | |
物種：大鼠 部位：大腦皮層 樣品：冰凍切片 稀釋率：1:200
<數(shù)據(jù)提供> 創(chuàng)價(jià)大學(xué) 糖鏈生命系統(tǒng)融合研究所 中嶋老師 |
與A公司抗體（兔源單克隆抗體）比較
A公司抗體 （兔源單克隆抗體） | 單克隆抗體 （產(chǎn)品編號：018-28523） | |
物種：小鼠 部位：大腦皮層 樣品：冰凍切片 稀釋率：1:1,000 |
◆應(yīng)用數(shù)據(jù)
免疫組織染色（小鼠）
| 物種：小鼠 部位：大腦皮層 樣品：冰凍切片 稀釋率：1:1,000 |  | 物種：小鼠 部位：大腦皮層 樣品：冰凍切片 稀釋率：1:200 <數(shù)據(jù)提供> 山梨大學(xué) 醫(yī)學(xué)部 藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)室 小泉老師 |
| 物種：小鼠 部位：大腦皮層 樣品：冰凍切片 稀釋率：1:200 備注：冰凍切片制備 → PFA 固定 <數(shù)據(jù)提供> 大阪大學(xué) 大學(xué)院醫(yī)學(xué)系研究科 綜合藥理學(xué) 稻生老師 |
| 物種：小鼠 部位：大腦皮層 樣品：冰凍切片 稀釋率：1:1,000 <數(shù)據(jù)提供> 京都大學(xué)大學(xué)院 工學(xué)研究科 浜地研究室 野中老師 |
| 物種：小鼠 部位：大腦皮層 樣品：冰凍切片 稀釋率：1:1,000 <數(shù)據(jù)提供> 順天堂大學(xué) 醫(yī)學(xué)部 神經(jīng)生物學(xué)?形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)室 伊藤老師 |
| 物種：小鼠 部位：大腦皮層 樣品：冰凍切片 稀釋率：1:1,000 <數(shù)據(jù)提供> 筑波大學(xué) 分子神經(jīng)生物學(xué) 鶴田老師 上田老師 |
| 物種：小鼠 部位：大腦皮層 樣品：冰凍切片 稀釋率：1:1,000 <數(shù)據(jù)提供> S大學(xué) O老師 |
| 物種：小鼠 部位：大腦皮層 樣品：冰凍切片 稀釋率：1:1,000 <數(shù)據(jù)提供> R研究所 Y老師 |
| 物種：小鼠(APPNL-F/NL-F) 部位：大腦 樣品：固定組織切片 稀釋率：1:200 備注：通過AbScale法進(jìn)行透明化 <數(shù)據(jù)提供> 國立研究開發(fā)法人理化學(xué)研究所 細(xì)胞功能探索技術(shù)研究小組 濱老師 |
| 物種：小鼠(阿爾茨海默病模型) 部位：大腦皮層 樣品：冰凍切片 稀釋率：1:500 <數(shù)據(jù)提供> 名古屋大學(xué)大學(xué)院 醫(yī)學(xué)系研究科 功能組織學(xué) 小西老師 |
| 物種：小鼠(Focal Stroke模型) 部位：大腦皮層 樣品：石蠟切片 稀釋率：1:500 <數(shù)據(jù)提供> C大學(xué) M老師 |
| 物種：小鼠(神經(jīng)元蠟樣脂褐質(zhì)沉積癥模型) 部位：大腦皮層 樣品：石蠟切片 稀釋率：1:500 <數(shù)據(jù)提供> J大學(xué) T老師/S老師 |
| 物種：小鼠 部位：海馬體 樣品：冰凍切片 稀釋率：1:1,000 <數(shù)據(jù)提供> A大學(xué) F老師 |
| 物種：小鼠(APPNL-G-F) 部位：海馬體 樣品：冰凍切片 稀釋率：1:1,000 <數(shù)據(jù)提供> 東京大學(xué)大學(xué)院 藥學(xué)研究科 機(jī)能病態(tài)學(xué)教室 高虎老師 |
| 物種：小鼠 部位：腦干（三叉神經(jīng)感覺主核） 樣品：薄片切片 稀釋率：1:500 備注：通過Scale法進(jìn)行透明化 <數(shù)據(jù)提供> 東京女子醫(yī)科大學(xué) 醫(yī)學(xué)部 生理學(xué)系 植田老師 |
| 物種：小鼠 部位：視網(wǎng)膜（術(shù)后） 樣品：冰凍切片 稀釋率：1:500 <數(shù)據(jù)提供> 愛知醫(yī)科大學(xué) 生理學(xué)系 林老師 |
| 物種：小鼠 部位：視網(wǎng)膜(Flat-mount) 樣品：冰凍切片 稀釋率：1:2,000 <數(shù)據(jù)提供> 東京大學(xué) 醫(yī)學(xué)部附屬醫(yī)院 渡邊老師 巖川老師 |
| 物種：小鼠 部位：視網(wǎng)膜(Flat-mount) 稀釋率：1:1,000 <數(shù)據(jù)提供> 東京大學(xué) 醫(yī)學(xué)部附屬醫(yī)院 渡邊老師 巖川老師 |
正常
| 激活誘導(dǎo) | 物種：小鼠 部位：視網(wǎng)膜(Cross-section) 樣品：冰凍切片 稀釋率：1:2,000 <數(shù)據(jù)提供> 東京大學(xué) 醫(yī)學(xué)部附屬醫(yī)院 渡邊老師 巖川 老師 | |
| 物種：小鼠 部位：脊髓 樣品：冰凍切片 稀釋率：1:2,000 <數(shù)據(jù)提供> 東京理科大學(xué) 生命生物科學(xué)科 萩原老師 澤田老師 |
| 物種：小鼠 部位：腰脊髓 樣品：冰凍切片 稀釋率：1:2,000 <數(shù)據(jù)提供> 九州大學(xué) 神經(jīng)內(nèi)科 高瀨先生 |
| 物種：小鼠 部位：肺 樣品：石蠟切片 稀釋率：1:1,000 <數(shù)據(jù)提供> N大學(xué) K老師 |
大鼠
| 物種：大鼠 部位：大腦皮層 樣品：冰凍切片 稀釋率：1:1,000 |
| 物種：大鼠 部位：大腦皮層（內(nèi)側(cè)前額葉皮層） 樣品：冰凍切片 稀釋率：1:1,000 <數(shù)據(jù)提供> 香川大學(xué) 醫(yī)學(xué)部 形態(tài)?機(jī)能醫(yī)學(xué)系 神經(jīng)機(jī)能形態(tài)學(xué) 太田老師 |
免疫細(xì)胞染色
| 細(xì)胞種類：SIM-A9 稀釋率：1:200 <數(shù)據(jù)提供> T大學(xué) I老師 |
流式細(xì)胞術(shù)
使用BD Cytofix/Cytoperm™ Fixation/Permeabilization Kit (BD Biosciences, 554714) 固定和透化處理小膠質(zhì)細(xì)胞系 BV-2 細(xì)胞。然后添加Buffer或Isotype control或本抗體，再添加PE標(biāo)記二抗（SouthernBiotech，4030-09），最后使用流式細(xì)胞術(shù)檢測熒光標(biāo)記的細(xì)胞。
【結(jié)果】
使用抗Iba1抗體和流式細(xì)胞術(shù)可以檢測固定和透化處理的BV-2 細(xì)胞。
◆用戶使用反饋
FUJIFILM Wako收集了在2023年3-5月舉辦的“抗 Iba1 兔單克隆抗體樣品派發(fā)活動(dòng)"中研究人員對樣品的使用評價(jià)。以下公布研究人員的問卷調(diào)查結(jié)果。
評估問卷 答復(fù)者：33 人（截止2023 年 7 月 21 日）
Q．對該抗體的滿意度
| Q．今后愿意繼續(xù)使用本產(chǎn)品嗎？ | Q．和目前正在使用的抗Iba1抗體相比如何？ |
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用戶反饋（原文翻譯） 同意公布其反饋意見的所有人員名單如下
綜合評價(jià) | 所屬單位 | 姓名 | 反饋意見 |
滿意 | 大阪大學(xué) 大學(xué)院醫(yī)學(xué)系研究科 綜合藥理學(xué) | 稻生大輔老師 | 目前，由于實(shí)驗(yàn)原因，染色的條件為 "制備未固定冰凍切片 → PFA 固定 "（部分神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域使用的抗體通過上述的Protocol可獲得良好的染色效果，因此最近常用于超分辨率成像）。根據(jù)該P(yáng)rotocol進(jìn)行染色時(shí)，使用之前常用的多克隆抗體染色的效果不佳，但6A4卻能很好地染色。所以，我認(rèn)為6A4是非常有用的抗體。 |
滿意 | 京都大學(xué)大學(xué)院 工學(xué)研究科 浜地研究室 | 野中洋 老師 | 染色結(jié)果與常規(guī)的多克隆抗體（FUJIFILM Wako）相比毫不遜色。 |
滿意 | 近畿大學(xué) 理工學(xué)部 發(fā)生生物學(xué)研究室 | 駒田致和 老師 | 染色效果很好，但是現(xiàn)有產(chǎn)品及其他公司產(chǎn)品的染色效果也很好，因此無法看出它們間的區(qū)別。 |
滿意 | 東京女子醫(yī)科大學(xué) 醫(yī)學(xué)部 生理學(xué)講座 | 植田楨史 老師 | 本次大腦切片染色時(shí)配合使用Scale法進(jìn)行組織透明化，與其他用于免疫染色的抗體相比，顯示出更好的組織滲透性。對比迄今為止使用的兔和山羊多克隆抗體（FUJIFILM Wako）也毫不遜色。 |
滿意 | 長崎大學(xué) 藥學(xué)部 基因組學(xué)與制藥學(xué) | 城谷圭朗 老師 | 非常好，小膠質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)清晰可見 |
滿意 | 兵庫醫(yī)科大學(xué) 腦神經(jīng)外科 | 武田由紀(jì) 老師 | 與其他產(chǎn)品相比無差別 |
滿意 | 理化學(xué)研究所 細(xì)胞機(jī)能探索技術(shù)研究小組 | 濱裕老師 | 從穩(wěn)定供應(yīng)的角度出發(fā)，兔源單克隆納入產(chǎn)品陣容是可以理解的，但是考慮到多重染色變化的靈活性，我希望能看到更豐富的小鼠單克隆產(chǎn)品陣容。 |
滿意 | A大學(xué) | F老師 | 使用成年小鼠大腦的冷凍切片進(jìn)行熒光免疫染色時(shí)，背景低，小膠質(zhì)細(xì)胞延伸出的細(xì)小突起也清晰可見，染色效果好。 |
滿意 | C大學(xué) | M老師 | 染色效果清晰。 |
滿意 | J大學(xué) | T老師和S老師 | 與傳統(tǒng)的兔源多克隆 Iba1 抗體（可能是常見批次）相比，信號大致相同，但沒有那么強(qiáng)烈。 |
滿意 | K大學(xué) | O老師 | 目前，我們正在使用兔源多克隆抗體(019-19741)評估大鼠的大腦皮層小膠質(zhì)細(xì)胞的突起長度和分支數(shù)，已確認(rèn)染色效果基本相同。考慮到各批次數(shù)據(jù)的穩(wěn)定性，單克隆抗體更具優(yōu)勢，因此我認(rèn)為這次替換十分有意義。 |
滿意 | N大學(xué) | K老師 | 由于獲得了非常有趣的數(shù)據(jù)，目前正在進(jìn)行更多的實(shí)驗(yàn)。 |
滿意 | T大學(xué) | H老師 | 染色結(jié)果與多克隆抗體一致真是太好了。 |
滿意 | T大學(xué) | I老師 | 使用小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞 SIM-A9 進(jìn)行了免疫染色。 由于我們還沒有進(jìn)行詳細(xì)的研究，所以我們不能透露關(guān)于細(xì)胞固定方法等的任何信息，但能夠獲得良好的陽性圖像。 |
一般滿意 | 愛知醫(yī)科大學(xué) 生理學(xué)系 | 林壽來 老師 | 在激光手術(shù)后的小鼠眼部切片中觀察到了小膠質(zhì)細(xì)胞染色。 |
一般滿意 | 順天堂大學(xué) 醫(yī)學(xué)部 神經(jīng)生物學(xué)/形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)室 | 伊藤祥吾 老師 | 使用該抗體能順利染色小膠質(zhì)細(xì)胞，但我認(rèn)為貴公司的兔源多克隆抗體（019-19741）能更好地檢測小膠質(zhì)細(xì)胞的突起。 |
一般滿意 | 東京大學(xué)大學(xué)院 藥學(xué)系研究科 機(jī)能病態(tài)學(xué)教室 | 高島翔 老師 | 已確認(rèn)其性能與常規(guī)的多克隆抗體相當(dāng)。 |
一般滿意 | 名古屋大學(xué)大學(xué)院 醫(yī)學(xué)系研究科 機(jī)能組織學(xué) | 小西博之 老師 | 能染色，但信號強(qiáng)度不如 FUJIFILM Wako多克隆抗體。 |
一般滿意 | 山梨大學(xué) 醫(yī)學(xué)部 藥理學(xué)系 | 小泉修一 老師 | 能獲得清晰的染色圖，但感覺需要比多克隆抗體更高的濃度。免疫染色圖像不遜色于之前的多克隆抗體。 |
一般滿意 | H大學(xué) | M老師 | 巨噬細(xì)胞標(biāo)志物的整體染色效果并不理想，也無法判斷該抗體是特異性還是非特異性，還需要進(jìn)一步探討。 |
一般滿意 | K大學(xué) | N老師 | 可以獲得不遜色于之前一直使用的多克隆抗體的染色圖像，我很滿意。 |
一般滿意 | K大學(xué) | T老師 | 使用該抗體對小鼠腰脊髓的冰凍切片進(jìn)行了免疫熒光染色?？贵w結(jié)合性很強(qiáng)。 |
一般滿意 | R研究所 | Y老師 | 它顯示出與之前使用過的FUJIFILM Wako#019-19741相同的反應(yīng)性，能夠滿足于組織染色。 |
一般滿意 | S大學(xué) | O老師 | 與之前一直使用的多克隆兔源Iba1相比，感覺多克隆更強(qiáng)些，但使用沒有問題。 |
一般滿意 | T大學(xué) | M老師 | 目前還尚未發(fā)現(xiàn)與多克隆抗體的差異。 |
一般滿意 | W大學(xué) | O老師 | 陽性率與兔源多克隆抗體Iba1相同。兔源多克隆的信號更強(qiáng)。 |
◆相關(guān)產(chǎn)品
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| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品等級 | 備注 |
| 012-28521 | Anti Iba1, Rabbit Monoclonal Antibody (6A4), recombinant 抗Iba1，重組兔源單克隆抗體（6A4） | 20 μL | 免疫化學(xué)用 | - |
| 018-28523 | Anti Iba1, Rabbit Monoclonal Antibody (6A4), recombinant 抗Iba1，重組兔源單克隆抗體（6A4） | 100 μL | 免疫化學(xué)用 | - |
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